产品简介: DAB辣根过氧化物酶显色液(DAB Horseradish Peroxidase Color Development Kit)是一种依据辣根过氧化物酶(HRP)结合显色,用于*组化显色、原位杂交显色或Western、Southern、Northern、EMSA等膜显色的试剂盒。DAB即3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride, 是辣根过氧化物酶的常用底物。本显色液可以用于细胞或组织在*组化或原位杂交时结合的辣根过氧化物酶显色,也可用于Western等结合有辣根过氧化物酶的膜的显色检测 使用参考: 1、常规组织切片、细胞样品、膜与辣根过氧化物酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后,用适当洗涤液洗涤3~5次。 2、按(A):试剂(B):试剂(C)=5000:5000:3的比例混合, 即为DAB染色工作液,即配即用。 3、洗涤过组织后,去除洗涤液,加入适量DAB染色工作液,确保覆盖样品。 4、室温避光孵育或更长时间,直至显色至预期深浅。 5、去除DAB染色工作液,用蒸馏水清洗1~2次即可终止显色反应。 6、对组织切片或细胞样品,反应终止后,如有必要可用中性红染色液染色,便于观察。对于膜染色,反终止后可室温晾干避光保存。 注意事项: 1、 DAB是致癌物,请注意适当防护。 2、 试剂(A)、试剂(B)避免反复冻融。 3、为了您的*和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 常见问题: 常见问题及可能原因: 1、 背景显色太深 ① 在*组化时如果背景显色太深,考虑使用适当的封闭液进行封闭,例如选购适当的封闭液或使用和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。 ② 在进行含内源性酶的*组化时,如果背景显色太深,需注意灭活内源性酶。 ③可以考虑缩短显色时间,或降低二抗浓度。 ④ 选择适当强度的洗涤液,或延长洗涤时间。 2、没有显色或显色太弱 ①当提高一抗或二抗的浓度。检测二抗效果,滴一滴稀释二抗在膜上,检测二抗是否可以被正常显色。 ②考虑使用更加灵敏的放大检测体系,例如使用生物素检测体系。 ③适当延长显色时间,另外确定抗原修复是否对于使用的一抗是必需的。 *Important Note: This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications. 我们所提供的产品仅供科研使用,不得用于临床诊断、**、食品或者化妆品等用途!